20xx物流开题报告毕业论文79
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2024-10-12
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20xx 物流开题报告毕业论文
研究背景眼科最常见致盲眼病有白内障、青光眼、糖尿病视
网膜病变和黄斑病等，其中青光眼是继白内障后的第二致盲原
因，我国青光眼的发病率为 0.52%，患病人数约为 700 万。xx 年
资料显示世界青光眼发病人数到 xx 年将达到 7000 万，双眼盲目
人数达到 840 万(quigley et al.，xx)。众多的青光眼患者和青
光眼盲者，不仅给患者带来极大的身心痛苦，而且还造成社会和
经济的巨大负担，因此，预防、控制及治疗青光眼十分重要且迫
切!青光眼是一种由于病理性眼压增高导致的具有特征性视神经结
构损伤和视野缺损为表现的神经性退行性视神经病变，其最终的
结局是视网膜神经节细胞(rgcs)凋亡、视功能逐渐丧失
(buckingham et al.，xx)。目前已有大量保护 rgcs 的研究结
果，主要包括：改善视乳头微循环、谷氨酸途径抑制剂、神经营
养因子，诱导热休克蛋白表达及抗氧化治疗等。然而，青光眼的
发病机制至今尚未完全阐明。信号转导、受体通道研究在 rgcs 损
伤与保护中的作用近年来正得到关注。最新的研究方向和靶点之
一是关于能感受压力的受体通道可能参与传递病理刺激造成神经
损伤(quigley et al.，xx)。trpc6(transient receptor
potential，c6)是一个新发现的、压力敏感、参与神经元存活与
凋亡的钙离子通透膜通道蛋白。本人曾参与课题"trpc6通道在视
网膜缺血再灌模型中对视网膜神经节的保护作用"的研究，并获得
了有价值的前期研究结果：较为全面而精确的定位了 trpc6通道
基因和蛋白在 sd大鼠视网膜、尤其是 rgcs 上的表达和分
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布，trpc6在 rgc 层上有选择性的高表达;探讨了 trpc6在大鼠视
网膜缺血再灌(ischemia reperfusion,ir)损伤过程中的表达变
化，trpc6 基因和蛋白在视网膜缺血损伤中的再灌注后 24 小时，
出现一过性的表达升高;在体的药理学实验结果显示，其激动剂
oag 具有保护视网膜 ir 模型诱导的 rgcs 免受损伤，而拮抗剂
skf96365则促进了 rgcs 凋亡的发生，本研究拟进一步探讨 trpc6
的作用机制。研究发现，脑源性神经营养因子(brain-derived
neurotrophic factor,bdnf)与 trpc 通道在信号转导、调控细胞
存活的过程中有密切的联系。xx年4月中国科学院上海神经科学
研究所王以政研究员课题组在 nature neuroscience 上发表论
文，首次证实过表达 trpc6/trpc3可保护小脑神经元对抗因血清
剥夺而导致的细胞死亡，且发现 bdnf 位于 trpc3/6 介导的细胞保
护信号通路的上游(tai et al.，xxa;jia et al.，xx)。本课题
拟探讨 bdnf 介导 trpc6通道蛋白保护视网膜跟模型诱导的 rgcs
免受损伤的作用机制，对深入阐明青光眼的发病机制，为临床干
预治提供新的思路和药物干预靶点，具有一定的现实意义。本课
题的研究主要分为以下二部分：第一部分视网膜 ir 模型中调控
trpc 通道时bdnf的表达变化一、研究目的在 sd大鼠视网膜 ir 模
型中检测 bdnf 基因不同再灌注时间点的表达变化，同时检测抑制
trpc 通道时bdnf蛋白水平变化、探讨其表达类型对 rgcs 凋亡的
影响。
二、研究方法：
2
1、在视网膜 ir 模型中检测 bdnf 基因的表达。采用视神经血管钳
夹法建立视网膜 ir 模型，夹闭视网膜血供 60 分钟，分别于再灌
注后 3 小时、24 小时、48 小时、7 天处死大鼠，摘取眼球，显微
镜下剥离视网膜，提取视网膜总rna，利用反转录多聚酶链反应
(rt-pcr)及实时荧光定量pcr(real-time pcr)测定 bdnf 基因表达
变化。
2、抑制 trpc 通道时检测 bdnf蛋白的表达。建立大鼠视网膜 ir
模型，于视网膜缺血术前30 分钟，右眼通过玻璃体腔注射trpc
拮抗剂 skf96365 为实验组，左眼注射溶剂pbs 为阴性对照组，分
别于再灌后3 小时、6 小时、12小时、24 小时、48 小时、72 小时
处死大鼠，摘取眼球，显微镜下剥离视网膜，提取视网膜总蛋
白，蛋白质免疫印迹(western blot)检测 bdnf在视网膜组织中的
蛋白表达水平。
3、抑制 trpc 通道时检测 bdnf 基因的表达。将 sd大鼠分为4组，
分别进行如下处理：第一组，对眼球进行假手术，只行视神经分
离术，不行视网膜缺血手术;第二组，建立视网膜 ir 模型;第三组
于视网膜缺血术前30 分钟，通过玻璃体腔注射 pbs 溶液，然后再
建立视网膜 ir 模型;第四组于视网膜缺血术前30 分钟，通过玻璃
体腔注射注射skf96365，然后再建立视网膜 ir 模型。所有大鼠于
再灌注后 24 小时处死，摘取眼球，显微镜下剥离视网膜，提取视
网膜总rna，real-time pcr 测定 bdnf 基因表达变化。
三、研究结果 rt-pcr 及 real-time pcr 结果显示 bdnf mrna 在再
灌注后 3 小时开始出现升高，24 小时出现表达高峰，是对照组的
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摘要：
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20xx物流开题报告毕业论文研究背景眼科最常见致盲眼病有白内障、青光眼、糖尿病视网膜病变和黄斑病等，其中青光眼是继白内障后的第二致盲原因，我国青光眼的发病率为0.52%，患病人数约为700万。xx年资料显示世界青光眼发病人数到xx年将达到7000万，双眼盲目人数达到840万(quigleyetal.，xx)。众多的青光眼患者和青光眼盲者，不仅给患者带来极大的身心痛苦，而且还造成社会和经济的巨大负担，因此，预防、控制及治疗青光眼十分重要且迫切!青光眼是一种由于病理性眼压增高导致的具有特征性视神经结构损伤和视野缺损为表现的神经性退行性视神经病变，其最终的结局是视网膜神经节细胞(rgcs)凋亡、视功...
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