发酵现象实验报告（通用3篇）
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2024-07-10
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发酵现象实验报告（通用 3篇）
酵 象 告 篇发 现 实验报 1
一、实验目的
（1）掌握 床 酵法制 糖化 的工 流程及操作方法摇 发 备 酶 艺
（2）了解利用黑曲霉菌菌种 酵 的生 条件及注意事发 时 长 项
（3）熟 掌握 程中的无菌操作和培养条件的练 实验过 选择
二、实验仪器及试剂
菌种：黑曲霉
仪器：锥形瓶（500ml)、移液管、恒温水浴锅、秒表、50mL 比色管、牛皮纸、纱布
（8层）、pH 计。
药品：三水乙酸钠、冰醋酸、硫代硫酸钠、碘、氢氧化钠、硫酸、可溶性淀粉、玉米
粉、豆饼粉、麸皮
三、实验原理
摇瓶发酵是实验室常用的通风发酵方法，通过将装有液体发酵培养基的摇瓶放在摇床
上振荡培养，以满足微生物生长、繁殖及产生许多代谢产物对氧的需求。它是实验室筛选
好气性菌种，以及摸索种子培养工艺与发酵工艺的常用方法。
葡萄糖淀粉酶（EC3.2.1.3）系 名 淀粉统 为 α-1,4-葡聚糖葡萄糖水解酶，俗称糖化
酶，是国内产量最大的酶品种。糖化酶对淀粉分子的作用是从非还原末端切开 α-1,4
键，也能切开 α-1,3 键和 α-1,6 键，产生葡萄糖。
糖化酶有催化淀粉水解的作用，能从淀粉分子非还原末端开始，分解 α-1,4-葡萄糖
苷键生成葡萄糖。葡萄糖分子中含有醛基，能被次碘酸钠氧化，过量的次碘酸钠酸化后析
出碘，再用硫代硫酸钠标准溶液滴定，计算酶活力。
四、实验步骤
1.培养步骤
1.1 种子培养基制备及灭菌
将新鲜土豆去皮切块，称取 200~300 g 土豆块放入 500 mL 烧杯中，加入一定量水，
在电炉上煮沸至土豆块熟透，用 120 目纱布过滤，滤渣反复用一定量水清洗、过滤 2次，
合并各次滤液且定容至 1000 mL 即得土豆汁。取一定体积的土豆汁，在其中加入 5%的蔗
糖，溶解摇匀并调 pH 至5.5，即得种子培养基。将适量种子培养基倒入锥形瓶
（250ml），用 布塞塞住管口，并用牛皮 包扎，置 菌 中，于纱 纸 灭 锅 121℃下灭菌 30min。
待灭菌完毕，冷却取出。
1.2 发酵培养基制备及灭菌
取6只500mL 摇瓶，分别按装液量 100、200、300mL 配制培养基（玉米粉 6%、豆饼粉
2%、麸皮 1%），加水后稍微 ，使原料湿 ，浸入水中。用摇动 润 8层纱布包扎瓶口，再加牛
皮纸包扎。置灭菌锅中，于 121℃下灭菌 30min。
1.3 发酵培养基接种：将已生长好的菌种，在无菌条件下，按照 10%的接量（8%-
12%）接种到 酵培养基上。发
1.4 发酵培养基发酵：将摇瓶固定在摇床上，培养温度为 31℃，转速为 120r/min，培
养时间 96h。显微镜观察菌丝形态，用试纸测发酵液 pH，测定酶活力。摇瓶培养时观察各
种摇瓶机的结构。
2.糖化酶活力测定
2.1 待测酶液的制备：
精确吸取液体酶 1.00mL，先用少量的乙酸缓冲液溶解，并用玻璃棒捣研，将上清液小
心倾入容量瓶中。沉渣部分再加入少量缓冲液，最后全部移入容量瓶中，用缓冲液定容至
刻度（估计酶活力在 100~250u/mL 范围内），摇匀。通过 4层纱布过滤，滤液供测定用。
2.2 酶活力测定：
于甲、乙两支 50mL 比色管中，分别加入可溶性淀粉溶液 25mL 及缓冲液5mL，摇匀
后，于 40℃恒温水浴中预热 5min。在甲管（样品）中加入待测酶液 2mL，立刻摇匀，在此
温度下准确反应30min，立刻各加入氢氧化钠溶液 0.2mL，摇匀，将两管取出迅速冷却，
并于乙管（空白）中补加待测酶液 2mL。吸取上述反应液与空白液各 5mL，分别置于碘量
瓶中，准确加入碘溶液 10mL，再加氢氧化钠溶液 15mL，摇匀塞紧，于暗处反应15min。取
出，加硫酸溶液 2mL，立即用硫代硫酸钠标准液滴定，直至蓝色刚好消失为其终点。
2.3 酶活力计算：
样品酶活力（u/g 或u/mL）=579.9×(A-B)c×n 式中：A与B分别为空白、样品消耗硫
代硫酸钠标准溶液的体积，mL；c为硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L；n为稀释倍数。
五、数据分析
比较不同装液量下的菌体形态特征、酶活力，将结果填入下表：
装液量/mL
指标
酶活力
pH
菌体特征 100 420u/mL 4.2 200 510u/mL 4.1 300 570u/mL 3.8 出现球状的白色的
菌丝团，瓶壁上出现黑丝的孢子和菌丝
六、结论
1.不同的装液量对酶活力的影响是随着装液量的增加呈现上升的趋势，但是酶活力变
化不大，并且酶活力不高，与其他组数据相比接种量跟酶活力关
2.菌体特征在锥形瓶的瓶壁上出现白色的菌丝，在培养基中也出现了丝球
3.菌种新陈代谢的旺盛二氧化碳的释放增加，使pH 值逐渐下降，最终使培养基的 pH
下降至3.8 左右。
酵 象 告 篇发 现 实验报 2
探究酵母菌在无氧条件下发酵作用产生二氧化碳和酒精。
实验仪器及用品：
1.实验仪器：带胶塞和胶管的锥形瓶、小气球、Y形管、大烧杯、温度计、试管、比
色板、小烧杯、玻璃棒。
2.实验用品:白糖（100g）、一小包干酵母（约30g）、澄清的石灰水、酒精、橙色的
重铬酸钾溶液。（检测酒精的试剂。0.5ml 的浓硫酸溶有 0.1g 重铬酸钾，体积分数为
95 —％97％，在酸性条件下与酒精 生化学反 由橙色 灰 色）发应 变为绿
实验装置及说明：
澄清的石灰水可以检测气体中有二氧化碳，重铬酸钾溶液遇到酒精由橙色变为灰绿
色。
实验操作：
1.将（100ml）40℃温水倒入锥形瓶，再用汤匙将一大勺糖及适量干酵母加进来，搅
拌均匀后，将锥形瓶放在大烧杯中水浴保温温度保持在30—40 ℃左右。（先 酵母菌让 进
行有氧呼吸，是酵母菌迅速繁殖，并把葡萄糖分解成二氧化碳和水。）
2.观察到酵母菌培养液有气泡产生，塞上橡胶塞（这样做既可以避免气体散失，影响
后面实验效果，也为酒精的产生提供保障）。过一段时间后就可看到干瘪的气球慢慢膨胀
起来了。（酵母菌的无氧呼吸）
3.将夹子打开，挤压气球，使瓶内产生的气体徐徐通过胶管导入试管内的'澄清石灰
水中，石灰水变浑浊了(检测气体中有二氧化碳。原理：二氧化碳遇石灰水，石灰水变浑
浊)。
4.将重铬酸钾试剂分别滴在比色板的凹槽内，并分别标注1号、2号（作 照）、对3
号。在 3号 上滴试剂 1滴酒精，在 1号 上滴试剂 1滴酵母菌发酵液。发现 1号和 3号都由
橙色变成了灰绿色。
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发酵现象实验报告（通用3篇）酵象告篇发现实验报1 一、实验目的 （1）掌握床酵法制糖化的工流程及操作方法摇发备酶艺 （2）了解利用黑曲霉菌菌种酵的生条件及注意事发时长项 （3）熟掌握程中的无菌操作和培养条件的练实验过选择 二、实验仪器及试剂 菌种：黑曲霉 仪器：锥形瓶（500ml)、移液管、恒温水浴锅、秒表、50mL比色管、牛皮纸、纱布（8层）、pH计。 药品：三水乙酸钠、冰醋酸、硫代硫酸钠、碘、氢氧化钠、硫酸、可溶性淀粉、玉米粉、豆饼粉、麸皮 三、实验原理 摇瓶发酵是实验室常用的通风发酵方法，通过将装有液体发酵培养基的摇瓶放在摇床上振荡培养，以满足微生物生长、繁殖及产生许...
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